結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒紫外分光光度法說明書
紫外分光光度法 25管/24樣 50管/48樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
產(chǎn)品名稱:結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)試劑盒紫外分光光度法
貨號:LZ-S01210-A
規(guī)格 : 25管/24樣 50管/48樣
測試方法:紫外分光光度法
產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
發(fā)貨地 :上海
測定意義:
GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。
測定原理:
GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過340nm下測定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。
需自備的的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:25mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 7mL 試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝
后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 4mL 試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝
后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑四:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 9mL 試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝
后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑五:液體×1 支,-20℃保存;臨用前加入 0.5mL 蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑
分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
試劑六:粉劑×1 支,-20℃保存;臨用前加入 0.5mL 蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑
分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;
粗酶液制備
稱取 0.1~0.2g 組織(建議稱取約 0.1g 組織),加入 1mL 提取液,冰浴中勻漿。10000g ,4℃離心 10min,棄上清,在沉淀中加入 1mL 提取液充分混勻,置冰上待測
操作步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
生化檢測試劑盒常見問題:
在使用生化檢測試劑盒時(shí),可能會遇到一系列常見問題,這些問題主要涉及到試劑盒的使用、保存、有效期、樣本處理以及實(shí)驗(yàn)操作等方面。天津
以下是一些常見的問題及其解決方法:
一、?測定原理?:生化試劑盒通過化學(xué)反應(yīng)或酶促反應(yīng)測定樣本中物質(zhì)的含量或酶活性。常用的儀器包括分光光度計(jì)和酶標(biāo)儀,它們的測定原理基于朗伯-比耳定律。土壤、水質(zhì)、動植物組織、血清、細(xì)胞細(xì)菌、食品等樣本均可進(jìn)行測定?。
?二、選擇不同規(guī)格的試劑盒?:根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。如果實(shí)驗(yàn)室有酶標(biāo)儀且具備檢測波長,可以選擇微量法試劑盒;如果有分光光度計(jì)及相應(yīng)規(guī)格的比色皿,則可以選擇常量法或微量法試劑盒。建議購買前仔細(xì)閱讀說明書,確認(rèn)自備的儀器和試劑是否符合要求?。
?三、保存方法?:收到試劑盒后,如果暫時(shí)不用,應(yīng)按照外包裝上指示的溫度保存。拆開包裝后,應(yīng)按照每個(gè)試劑的保存溫度進(jìn)行保存,注意有些試劑忌反復(fù)凍融,有些粉劑溶解后性質(zhì)不穩(wěn)定?。
四、?有效期?:一般生化試劑盒的有效期為6個(gè)月,也有特殊貨號的有效期為1年。具體以實(shí)際收到貨物的標(biāo)簽信息為準(zhǔn)?1。
?五、樣本處理?:新鮮樣本和冷凍樣本都可用于大多數(shù)指標(biāo)的測定,但有些生理活性物質(zhì)容易降解,建議使用新鮮樣本測定。對于冷凍樣本,建議在-70℃或液氮中保存。樣本在不同溫度下的保存時(shí)間有所不同,例如4℃可保存一周,-20℃保存一個(gè)月,-80℃保存3個(gè)月?。
?六、土壤酶活性測定?:對于土壤酶活性的測定,建議將鮮土風(fēng)干并過篩后取樣,以測定的重復(fù)性。若使用鮮土測定,需樣本的顆粒大小一致且水分含量相似?。
七、?預(yù)測定?:在進(jìn)行正式測定前,建議選擇2-3個(gè)預(yù)期結(jié)果差別較大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。通過預(yù)測定可以全面反映樣品特點(diǎn)、試劑質(zhì)量、儀器設(shè)備穩(wěn)定性和操作規(guī)范性,確保正式測定結(jié)果真實(shí)可靠?。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
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KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 (His 標(biāo)簽)
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